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일상

실험실 기초적인 시약 제조 계산법 2🧪PBS 버퍼 제조, TE 버퍼 제조

by Sud0l 2020. 9. 23.

 

 

시약 제조 계산법 2탄으로 찾아왔습니다!

전 시간에는 알코올 소독약 제조와 NaOH시약 제조에 대해 알려드렸는데요:)
이번 시간엔 buffer 제조 계산에 대해 알려드리겠습니다

 


reagent MW [M] 1X
Na2HPO4 141.95897 0.01
KH2PO4 136.08569 0.0018
NaCl 58.44300 0.137
KCl 74.55150 0.0027

(*pH = 7.4)

 

보통 PBS 버퍼 계산은 위의 표처럼 WM와 [M]이 꼭 주어집니다.

 

1. 1X PBS 500ml을 제조하시오.

여기서 나오는 1X는 1배라고 생각하시면 돼요!

현미경에서도 몇X라고 나오는데 현미경에서 나오는 것처럼의 배수와 비슷합니다.

 

[M]은 1L을 기준으로 나온 것인데 우리는 500ml을 제조해야 하니

[M]에 주어진 값의 반씩을 이용하면 됩니다

그럼 각각 0.005, 0.0009, 0.0685, 0.00135를 사용하면 되겠지요?

 

②구한 [M] 값에  각각의 MW를 곱해줍니다.

141.96*0.005=0.7098g

136.09*0.0009=0.122481g

58.44*0.0685=4.00314g

74.55*0.00135=0.1006425g

∴ (매스 실린더에) 위의 식 대로 각각 넣어준 후 증류수를 500ml까지 붓는다.

 

2. 10X PBS 1L을 제조하시오.

10X는 [M] 값에 곱하기 10을 해주세요!

141.96*0.1=14.196g

136.09*0.018=0.244962g

58.44*1.370=80.0628g

74.55*0.027=2.01285g

∴ (매스 실린더에) 위의 식 대로 각각 넣어준 후 증류수를 1L까지 붓는다.

 

3. 1X PBS 500ml을 제조하려고 한다 실험실 시약에 Na2HPO4는 없고 

대신 Na2HPO4-12H2O이 있다. 이때 넣어주려고 하는 Na2HPO4-12H2O의 양은? 

①Na2HPO4와 Na2HPO4-12H2O의 차이점은 물분자(H2O)입니다.

물의 한 분자량이 18이고 이것이 12개 있다고 하였으니 12*18=216

 

기존의 분자량(MW)에 216을 더하면 됩니다.

216+141.9=357.9

 

③구한 분자량에 [M]을 곱해줍니다

이때의 [M]은 500ml이니 기존의 [M]의 반값이겠지요?

∴357.9*0.005=1.7895g


1X TE buffer 50ml을 제조해라.

①EDTA : 비례식을 이용하여 풀어보자!

0.5M=500mM

500mM*Xml=1mM*50ml

x=0.1ml=100μl

 

②TrisHCl : 비례식을 이용하여 풀어보자!

2M=2000mM

2000mM*Xml=10mM*50ml

10mM/2000mM*50ml=0.25ml=250μl

 

∴(매스실린더에)EDTA 100μl을 넣고, TrisHCl을 250μl을 넣어준 후 증류수로 50ml까지 채운다.